霍乱弧菌核酸 （恒温荧光法）

产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR 。

订购信息：
产品名称：霍乱弧菌核酸 （恒温荧光法）
规格：48T
编号：BH-P97187
分类：恒温荧光法
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。

准备物品：
清理液（A）毫升
染色液（t B）微升
稀释液（C）毫升
溶解液（tD）毫升
产品说明书1份
使用及效果：
PCR反应特点
(1)特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2)灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3)简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4)对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

检测步骤：
一、试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂每个反应加入的量N个反应加入的量
荧光PCR反应液14µL N×14µL
酶混合物1 µL N×1 µL
总量15 µL N×15µL
（1）计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环50℃for 2 min
预变性1循环95℃for 10 min
PCR扩增40循环95℃for 15 sec
60℃for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
A549,肺癌细胞系硝唑尼特Nitazoxanide>99%

THP 1细胞，单核细胞型瘤细胞前列腺癌细胞高转移亚系,PC-3M 2B4细胞结膜成纤维细胞总RNAHConF NA硝唑尼特()Nitazoxanide>99%,

非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS4A;Vero-HCV-NS4A寡霉素AOligomycin A>95%,美国进口原装

ESAM Others Human ESAM细胞裂解液(阳性对照)Olopatadine HClBR,细胞培养级，度大于99%

小鼠胚胎成纤维细胞(来自NIH3T3);PA12()Olopatadine HClHPLC>98%,
非洲绿猴肾细胞;VERO-76恶性胚胎横纹肌瘤，RD细胞KP-N-NS(肾上腺神经母细胞瘤细胞(脑转移))α-D-葡萄糖-1-1酸-二钠(>99.0%,BR)>99.0%,BRalpha-D-Glucose-1-phosphate, di salt, hydrate

EB病毒转化的B细胞;KMY0926α-甲基肉桂酸(>98%,BR)>98%,BRalpha-Methylcinnamic acid

FLRT3 Others Human FLRT3细胞裂解液(阳性对照)/雷利度胺>99.0%,BRLenalidomide

CM-R069大鼠肾成纤维细胞*培养基100mL/雷利度胺（）HPLC>98%,Lenalidomide

CLEC7A Others Human CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12细胞裂解液(阳性对照)>98%,BR,可用于细胞培养Letrozole
霍乱弧菌核酸 （恒温荧光法）IGFBP2 Protein Cynomolgus重组食蟹猴IGFBP2蛋白(His标签)野鸢尾黄素（）HPLC≥98%，Irisflorentin

FC33(胚胎肾细胞(Asp-2基因修饰)) 5×106cells/瓶×2小鼠巨噬细胞MMa刺芒柄花苷（）HPLC≥98%，Ononin

外周血白细胞Many types of cells5×105方(1ml)刺五加苷E（）HPLC≥98%，Eleutheroside E

YES1 Others Human c-Yes / YES1杆状病毒-昆虫细胞裂解液(阳性对照)刺五加皂苷B（）HPLC≥98%，Ciwujianoside B

正常大鼠肾细胞;NRK川陈皮素()HPLC≥98%，Nobiletin