人操作过程：

1、从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2、设置标准品孔、样本孔和空白孔，空白孔什么都不加；人孔各加不同浓度的标准品50μL。

3、待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL。

4、随后标准品孔和样本孔中（空白孔不加）参与辣根过氧化物酶（HRP）符号的检测抗体100μL，，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5、弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6、全部孔参与底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7、全部孔参与停止液50μL，15min内，在450nm波利益测定各孔的OD值。

人实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培育，而不适用于人培育，可运用滴片法；

2．所运用的盖玻片应该为优质玻璃制作，并通过铬酸洗液处理；

3．盖玻片十分薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；

4．假如需要更多成长状况共同的细胞，可以运用较大的培育皿，但不宜过大，以避免培育液的浪费和添加污染机率；

5．假如细胞贴壁成长才能较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晒干。